NATURSTOFKEMI n blev oprenset via en grov fraktionering på revers-fase silica og efterfølgende HPLC, figur 4. Det viste sig, at CNR107 produce- rede markant mere BE-43547A end BE-43547A . 2 1 Sammenligning af NMR-data fra BE-43547A med de fire 2 syntetiserede 1-A1-isomerer viste tydeligt, at isomeren 1-A1- anti P2 matchede, figur 5. Med naturstoffet i hånden kunne vi udføre biologiske eksperimenter, og her påviste vi, at BE- 43547A1 var toksisk samt hypoxi-selektivt. Konklusion og perspektiver Den sidste brik i puslespillet var at finde stereokemien af BE43547A1. Cirkulær dikroisme spektroskopi viste, at den syntetiserede isomer var enantiomeren af naturstoffet. Den rumlige konfiguration ved det kvaternære stereocenter blev tilordnet via en blanding af 2D-NMR og computermodellering. Resultatet (S-konfiguration) stemte overens med den stereokemi, som vores analyse af biosyntesen ligeledes indikerede. Vi har dermed fundet stereokemien af naturstoffet og fuldført den første totalsyntese af enantiomeren af BE-43547A . Vi har 1 fundet et DNA-fingeraftryk for APD-producerende bakterier, og vi har vist, at BE-43547-familien er den hidtil mest hypoxiselektive toksiske naturstoffer. I igangværende cellebiologiske studier undersøger vi, hvordan BE-43547A1 opnår sin selektivitet mod hypoxiske celler. Vi vil også prøve at fremstille simplificerede BE-43547A1analoger, som vi kan bruge til præ-kliniske studier i mus. I sidste ende kan vores studier forhåbentlig resultere i en øget overlevelse af kræftpatienter. E-mail: Thomas B. Poulsen: thpou@chem.au.dk Thomas Tørring: thomast@chem.au.dk Referencer 1. V illadsen, N. L.; Jacobsen, K. M.; Keiding, U. B.; Weibel, E. T.; Christian- sen, B.; Vosegaard, T.; Bjerring, M.; Jensen, F.; Johannsen, M; Tørring, T.; Poulsen, T. B. (2016): Synthesis of ent-BE-43547A reveals a potent hy- 1 poxia-selective anticancer agent and uncovers the biosynthetic origin of the APD-CLD natural products Nat. Chem., doi:10.1038/nchem.2657. 2. B rown, J. M.; Wilson, W. R. (2004) Exploiting tumour hypoxia in cancer treatment. Nat. Rev. Cancer, vol. 4, s. 437-447. 3. R ankin, E. B.; Giaccia, A. J. (2016) Hypoxic control of metastasis. Science, vol. 352, s. 175–180. 4. Sang, F.; Li, D.; Sun, X.; Cao, X.; Wang, L.; Sun, J.; Sun, B.; Wu, L.; Yang, G.; Chu, X.; Wang, J.; Dong, C.; Geng, Y.; Jiang, H.; Long, H.; Chen, S.; Wang, G.; Zhang, S.; Zhang, Q.; Chen, Y. (2014): Total synthesis and determination of the absolute configuration of rakicidin A. J. Am. Chem. Soc., vol. 136, s. 15787-15791. 5. Tsakos, M.; Clement, L. L.; Schaffert, E. S.; Olsen, F. N.; Rupiani, S.; Djurhuus, R.; Yu, W.; Jacobsen, K. M.; Villadsen; N. L.; Poulsen, T. B. (2016): Total synthesis and biological evaluation of rakicidin A and discovery of a simplified bioactive analogue. Angew. Chem. Int. Ed., vol. 55, s. 1030-1035. 6. T sakos, M.; Jacobsen, K. M.; Yu, W.; Villadsen, N. L; Poulsen, T. B. (2016) The rakicidin family of anticancer natural products - synthetic strategies towards a new class of hypoxia-selective cytotoxins. Synlett., vol. 27, s. 1898-1906. 7. N ishioka, H.; Nakajima, S.; Nagashima, M.; Kojiri, K.; Suda, H. (1998) BE43547 series substances, their manufacture with Streptomyces species, and their use as antitumor agent. Japanese patent 10147594 A 19980602. 8. Albright, J. C.; Goering, A. W.; Doroghazi, J. R.; Metcalf, W. W.; Kelleher, N. L. (2014) Strain-specific proteogenomics accelerates the discovery of natural products via their biosynthetic pathways. J. Ind. Microbiol. Biotechnol., vol. 41, s. 451-459. NEED A CREATIVE ADVIPSOR? Between you and your ideas, we’ll find the spark for brilliant business opportunities. From IP strategy, legal services and analysis to patents, trademarks, design and copyright, we help illuminate the vast potential in your creation. www.awapatent.com dansk kemi, 98, nr. 3, 2017 13
Download PDF fil
Se arkivet med udgivelser af Dansk Kemi her
TechMedias mange andre fagblade kan læses her